Спасибо, ваше сообщение принято.

Наши менеджеры обработают его
и свяжутся с Вами максимально быстро.

Корзина пуста

Целесообразность дальнейшего культивирования криоконсервированных эмбрионов третьего дня развития при неудачных предыдущих попытках вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ)
12.12.2014

Целесообразность дальнейшего культивирования криоконсервированных эмбрионов третьего дня развития при неудачных предыдущих попытках вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ)

 

Ю.П.Вдовиченко, И.Е. Палыга, К.В. Граждан
Клиника репродукции человека "Альтернатива", г.Львов

Авторы обосновывают целесообразность дальнейшего культивирования криоконсервированных эмбрионов третьего дня развития до стадии бластоцисты при неудачных предыдущих попытках ВРТ. Это дает возможность оценить качество эмбрионов, а также провести селекцию наиболее перспективных эмбрионов, учитывая высокий потенциал развития и вероятность имплантации, что невозможно при эмбриотрансфере (ЭТ) криоконсервированных эмбрионов, размороженных в день переноса. Исследованы криоконсервированные эмбрионы 125 пациенток, беременность с применением криоконсервированных эмбрионов, достигших стадии бластоцисты, наблюдалась в 49% случаев, на эмбрионах 3-его дня культивирования, ЭТ которых осуществлялся в день разморозки, беременность наблюдалась в 37,1% случаев. Полученные данные свидетельствуют о улучшении результативности циклов ВРТ с использованием криоконсервированных эмбрионов, достигших стадии бластоцисты.

В практике ВРТ широкое применение получил метод криоконсервации. Он решает проблемы сохранения и дальнейшего использования избыточного биоматериала, получаемый во время циклов оплодотворения in vitro. При низких температурах эмбрионы хранятся в жизнеспособном состоянии и их метаболическая активность не нарушается, а эффективность использования, то есть уровень имплантации, не уступает программам использования свежих эмбрионов. Процент эмбрионов выживших после криоконсервации составляет 85-90%. Для проведения процедуры криоконсервации применялся метод витрификации, комбинирующий использование высококонцентрированных растворов криопротекторов и практически мгновенного охлаждения путем погружения образцов непосредственно в жидкий азот. Основным преимуществом данного метода является минимизация формирования кристалликов внутриклеточного льда, которые могут повредить структуры клетки. Кроме того, витрификация характеризуется отсутствием нежелательных осмотических эффектов дегидратации и регидратации вследствие внеклеточного кристаллообразования. Метод является быстрым, простым в исполнении и не требует стоимостного программного оборудования.

Проблема использования криоконсервированных эмбрионов заключается в том, что очень трудно определить эмбрион с сохраненным высоким потенциалом развития и имплантации на момент разморозки и ЭТ. Эмбрион может хорошо перенести криоконсервации, однако времени от момента оттаивания в ЭТ может быть не достаточно, чтобы увидеть изменения в развитии и метаболизме клетки. Это связано с остановкой метаболических процессов при криоконсервации, индивидуальным потенциалом каждого эмбриона, сроком хранения, методике, используемой для криоконсервации.

Целью данного исследования был поиск оптимизации отбора эмбрионов для ЭТ, сохранивших свой потенциал развития и имплантации после криоконсервации.

Материалы и методы

Были созданы две группы пациенток в возрасте от 30 до 36 лет, у которых в циклах ВРТ на свежих эмбрионах получен отрицательный результат. Все пациентки были избыточные эмбрионы после цикла ВРТ. Эмбрионы получили методом оплодотворения ICSI и криоконсервированные с помощью витрификации.

Факторами бесплодия были: трубно-перитонеальный, эндокринный, и совокупность факторов.

До начала лечения проводились следующие обследования: сбор соматического, акушерско-гинекологический анамнез, УЗИ, клинико-лабораторное, биохимическое и гормональное исследование.

Первая группа - исследовательская: размороженные криоконсервированные эмбрионы 3 дня культивировались до 5 суток (стадии бластоцисты). Для ЕТ были использованы эмбрионы лучшего качества, что сохранили потенциал развития и имплантации.

Вторая группа - контрольная: размороженные криоконсервированные эмбрионы 3 дня. ЕТ состоялся в день оттаивания, для ЭТ были использованы эмбрионы, которые перенесли криоконсервацию лучше.

Среднее количество размороженных эмбрионов на одну пациентку составляла 4-7 ± 1. Среднее количество эмбрионов для ЭТ на одну пациентку составляла 3 эмбриона.

Для проведения процедуры криоконсервации применялся метод витрификации. Заморозка, оттаивания, культивирования и все манипуляции с эмбрионами проводились согласно рекомендациям и инструкциям производителей сред.

При криоконсервации оболочка эмбрионов становится твердой, что препятствует выходу бластоцисты за пределы оболочки и уменьшает вероятность имплантации и наступления беременности. Поэтому после оттаивания для всех эмбрионов был применен механический хетчинг, что является дополнительным положительным фактором при культивировании.

Все исследования проводились согласно Хельсинской декларацией Всемирной Ассоциации "этическим принципам научных и медицинских исследований с участием человека" (2000г.).

Лечебные процедуры проводились в соответствии с нормативными документами, утвержденными Министерством здравоохранения Украины.

Все пациенты дали согласие на участие в этих исследованиях.

Результаты исследования и их обсуждение

Согласно результатам проведенных исследований установлено, что в опытной группе у 55 пациенток было криоконсервированных и размороженных 310 эмбрионов 3 дня культивирования. Хорошо перенесли криоконсервацию 275 эмбрионов (88,8%). На 4 день культивирования компактизация и образования морулы произошло в 180 эмбрионах (65,4%). На 5 день культивирования 117 эмбрионов доросли до стадии бластоцисты, что составило 65% от общего количества.

Большинство бластоцист отвечали нормам качества (2А / А (В) -4 А / А (В)) по классификации D.Garder.

Среднее количество эмбрионов на ЭТ составила 2,1 эмбриона на пациентку. Беременность была зафиксирована в 32 пациенток (58%). Из них в 27 пациенток (49%) беременность пролонгировалась, биохимическая беременность наблюдалась у 5 пациенток (9%).

В контрольной группе у 70 пациенток было криоконсервированных и разморожен 285 эмбрионов 3 суток культивирования. После оттаивания хорошо перенесли криоконсервации 221 эмбрион (77,5%). На ЭТ, который состоялся в день размораживания, было отобрано 178 эмбрионов (62,4%) от общего количества. Среднее количество эмбрионов на ЭТ составила 2,5 эмбриона на пациентку. Беременность зафиксирована в 32 пациенток (45,6%), из которых в 26 пациенток (37,1%) беременность развивалась, в 6 пациенток была обнаружена биохимическая активность (8,5%).

На основании полученных результатов можно сделать вывод, что культивирование эмбрионов 3 суток развития после витрификации до стадии бластоцисты дает возможность отобрать наиболее перспективные эмбрионы для ЭТ. Такие эмбрионы сохранили жизнеспособность и их метаболическим активность не нарушена, а потенциал развития и имплантации не уступает свежим.

Это дает возможность значительно улучшить результативность циклов ВРТ с использованием криоконсервированных эмбрионов 3 суток развития до стадии бластоцисты у пациенток с отрицательным результатом на свежих эмбрионах.

Выводы

Культивирование размороженных эмбрионов после криоконсервации до 5 дня (стадии бластоцисты) позволяет отобрать эмбрионы, которые сохранили высокий потенциал развития и имплантации. Это существенно повышает процент положительных результатов в циклах ВРТ с использованием криоконсервированных эмбрионов.

Литература:

  1. Choi D., Chung H., Lim J., Ko J., Yoon T., Cha K. Pregnancy and delivery of healthy infants developed from vitrified blastocysts in an IVF-EF program//Fertil.Steril.-2000.-Vol.74.-P.838-839.
  2. Choi D., Chung H., Lim J., Ko J.,  Cha K, Hong S, Lee S., Han S. In vitro blastocyst formation of human oocytes obtained from unstimulated and stimulated cycles after vitrification at various maturational stages// Fertil.Steril.-2000.-Vol.73.-P/545-551
  3. El-Danasouri I., Selman H. Successful pregnancies and deliveries after a simple vitrification protocol for day 3 human embryos// Fertil.Steril.-2001.-Vol.76.-P.400-402
  4. Kuleshova L., Gianaroli L., Magli C., Ferraretti A., Trounson A. Birth following vitrification of small number of human oocytes//Hum.Reprod.-1999.-Vol.14.-P.3077-3079
  5. Selman H., El-Danasouri I. Pregnancies derived from vitrified human zygotes// Fertil.Steril.-2002.-Vol.77.-P.422-423.
  6. Trounson A. Preservation of human eggs and embryos// Fertil.Steril.-1986.-Vol.46.-P.1-12
  7. Горбунов Л.В. Оценка жизнеспособности эмбрионов и эффективности технологии их криоконсервирования//Проблемы криобиологии.-Харьков.-2003.-№4.-С.35-40
  8. Горбунов Л.В., Бучацкий Л.П. Криоконсервация половых клеток и эмбрионов: Монография-К.: Издательско-полиграфический центр “Киевский университет”, 2005.-325 с.

Имя: *
Е-mail: *
Отзыв: *
Код защиты: * Сменить код
* - поля, обязательные для заполнения
Статьи
Хирургия
Врожденные кисты и фистулы шеи
Врожденные кисты и фистулы шеи...
Врожденные кисты и свищи шеи образуются вследствие неполной облитераци...
Заболевания суставов и опорно-двигательной системы
Лечение обострения заболеваний спины, сопровождающ
Лечение обострения заболеваний спины, сопровождающ...
Лечение обострения заболеваний спины, особенно при наличии тяжелых нев...
Женские болезни
Трубное бесплодие
Трубное бесплодие...
При трубной форме бесплодия, которое представляет от 35 до 40% всех ви...
Новые медицинские учреждения
  • Интернет-магазин
  • SKYDENT
  • «Аксимед» — Клиника современной неврологии
  • Студия красоты и развития
  • Алтес - Сумы
  • Мед Люкс Детокс
  • DietCenter
  • Лико-Мед
  • Сучасна стоматологія Денітка- Луцьк